Методы выделения вируса
Среди методов выделения растительных вирусов самым быстрым является метод погружения. Край листа отрезают и место среза погружают на 1 — 2 с в каплю дистиллированной воды, помещенную на мельчайшую сетку с целлулоидной пленкой. Некоторая часть вирионов вымывается этой каплей из растения, капля высыхает, и вирусные частицы оказываются на пленке. Теперь их остается только закрепить и контрастировать. Однако в каплю воды попадает сок растения, а это значит, что при высыхании рядом с вирусными частицами может оказаться множество посторонних белковых частиц, похожих на вирусы.
Конечно, ученые стремятся получить препарат как можно более чистый. Удовлетворяется это стремление за счет усложнения методов и комбинирования различных приемов. Дифференциальное центрифугирование, о котором сообщалось ранее, с успехом применяется в тех случаях, когда вирионы заметно отличаются по величине от клеточных компонентов. Центрифугирование в градиенте плотности сахарозы позволяет разделить частицы, незначительно отличающиеся друг от друга.
Из больших объемов жидкостей вирус лучше выделять методами высаливания или осаждения в изоэлектрической точке. Иногда вирусы поглощаются смолами.
Бактерии и другие крупные частицы можно уловить путем фильтрования через специальные фильтры из инфузорной земли, фарфора, асбеста, которые задерживают частицы размером не менее 0,5 мкм (1 мкм = КГ4 см). Вирусы, размеры которых составляют от 0,01 до 0,3 мк (от 100 до 3000А), почти всегда проходят через бактериальные фильтры, но в распоряжении ученых есть и ультрафильтры (например, нитроцеллюлозные мембраны), которые могут задержать и вирус. С помощью таких мембран определяют размеры вирусных частиц даже тогда, когда вирионов очень мало. Для этого необходимо «просеять» вирусы последовательно через ряд мембран с порами разной величины, заметить фильтр, задерживающий наибольшее количество частиц, и измерить диаметр пор.
В 21 веке учённые продвигаются значительно вперед в области исcледований вирусов, вирусология как наука неумолимо развивается. Благодаря такому быстрому развитию науки и техники естественным образом появятся новые методы выявления вируса.